2018-01-30
污染是培养基质量不好引起的吗？
1.培养基不是无菌产品，但有菌落数量控制。 2.培养基在使用前通过高压或过滤灭菌。 3.防止污染应该注意以下事项： A.从污染的源头开始 确认工作细胞库是否被污染：用细菌、真菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。 确认毒种工作种子批是否被污染：用细菌、真菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。 确认所用培养基及其添加成分
2018-01-30
L－谷氨酰胺在细胞培养中重要吗？它在溶液中不稳定吗？
L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的，脱掉氨基后，L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和核酸代谢。但L-谷氨酰胺在溶液中不稳定，在高温下会分解成吡咯烷酮和羧酸，也有一些毒降解产物如NH4+会不可逆转地损坏细胞壁。 L-谷氨酰胺在不同温度、不同PH值条件下的稳定性研究如下。
2018-01-30
细胞生长质量很好，为什么病毒、蛋白表达量没有提高？
如果菌毒种各项检定合格，可用于疫苗生产的情况下，细胞生长质量无疑就是高表达的必要条件。 采用细胞生产的疫苗是体外培养一定量的动物细胞并接种病毒，利用病毒在细胞内增殖，得到预期的病毒抗原，然后制成疫苗。细胞生长质量包括细胞密度和形态，没有好的细胞生长质量就不可能有高的表达量。 但要注意的是，细胞生长质量好、密度厚度大时候病毒接种量也应该相应增大，表达量才会提高，否则前期的高质量细胞培养就可能浪费
如图所示，培养基pH值随着碳酸氢钠量的增加，呈抛物线增长，当碳酸氢钠加到一定量时，pH变化越来越小。而培养基的渗透压值随着碳酸氢钠量的增加，呈直线增长，碳酸氢钠量越大，渗透压值越大。 如果为了达到工作pH值仅加入少量的碳酸氢钠，而忽略渗透压，一来可能会达不到缓冲效果而引起细胞培养过程中pH值变化较剧烈，二来会使培养基成为低渗溶液，在培养细胞时易造成细胞膨胀破裂;如果为了达到工作pH值而加入大量碳
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2018/01
