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常见问题
怎样用碳酸氢钠调pH值?
如图所示,培养基pH值随着碳酸氢钠量的增加,呈抛物线增长,当碳酸氢钠加到一定量时,pH变化越来越小。而培养基的渗透压值随着碳酸氢钠量的增加,呈直线增长,碳酸氢钠量越大,渗透压值越大。
污染是培养基质量不好引起的吗?
确认工作细胞库是否被污染:用细菌、真菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。
L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗?它在溶液中不稳定吗?
L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的,脱掉氨基后, L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和核酸代谢。但L-谷氨酰胺在溶液中不稳定,在高温下会分解成吡咯烷酮和羧酸,也有一些毒降解产物如NH4+会不可逆转地损坏细胞壁。
细胞生长质量很好,为什么病毒、蛋白表达量没有提高?
如果菌毒种各项检定合格,可用于疫苗生产的情况下,细胞生长质量无疑就是高表达的必要条件。采用细胞生产的疫苗是体外培养一定量的动物细胞并接种病毒,利用病毒在细胞内增殖,得到预期的病毒抗原,然后制成疫苗。细胞生长质量包括细胞密度和形态,没有好的细胞生长质量就不可能有高的表达量。 但要注意的是,细胞生长质量好、密度厚度大时候病毒接种量也应该相应增大,表达量才会提高,否则前期的高质量细胞培养就可能浪费了。 同时病毒、蛋白的表达、分泌在一定浓度下可能会饱和,因此如欲获得高表达,还须研究合适的收液时间和次数。